一、導(dǎo)致高基線和變化基線的流動相雜質(zhì)：
? ? ? ? 雜質(zhì)在流動相中高度溶解的特定情況下，它們不會被色譜柱截留，并有助于在整個色譜圖中產(chǎn)生高于正常的檢測器信號。使用梯度洗脫時，如果雜質(zhì)僅存在于梯度中使用的一種溶劑中，則檢測器信號可能會緩慢變化并且與在任何時間點(diǎn)對流動相有貢獻(xiàn)的溶劑比例有關(guān)。
? ? ? ? 流動相雜質(zhì)不會表現(xiàn)為看起來像典型色譜峰的信號特征，因此它們不會直接與分析物峰本身發(fā)生沖突。但是如果雜質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)與分離中的目標(biāo)分析物相似，則雜質(zhì)可以表現(xiàn)為基線中看起來像典型峰的特征。有時這些被稱為“鬼峰”，因?yàn)榧词箾]有樣品注入，它們也會持續(xù)存在于基線中。
二、檢測器對主要流動相組分的響應(yīng)：
? ? ? ? 有時候用于 LC 方法的溶劑制備中的微小變化會對基線的外觀產(chǎn)生巨大影響。這種效應(yīng)的一個典型例子是從磷酸鹽緩沖流動相變?yōu)槭褂眉姿嶙鳛樘砑觿┑牧鲃酉唷１M管磷酸鹽物質(zhì)對低至約 200 nm 的紫外光具有高度透明性，但羧酸鹽物質(zhì)（如甲酸鹽、乙酸鹽）比約 230 nm 以下的磷酸鹽吸收更多。當(dāng)使用梯度洗脫時，很容易觀察到這種差異，并且添加劑僅存在于流動相梯度中使用的一種溶劑中（例如，大部分水性溶劑）。
三、由于泵問題導(dǎo)致流動相組成不一致：
? ? ? ? ?粘性止回閥和滯留氣泡是高壓泵頭流量不一致的常見原因，當(dāng)二元泵系統(tǒng)中的兩個泵中的一個發(fā)生故障時，可能會導(dǎo)致通過 HPLC 色譜柱并最終到達(dá)檢測器的流動相成分發(fā)生極端變化。如果使用中的檢測器對這些成分變化很敏感，那么異常檢測器基線可能是真正由泵引起的問題的征兆。一個極端的例子是 A 溶劑含有乙酸銨，B 溶劑是乙腈，并且在 210 nm 處使用 UV 檢測的情況。在這種情況下，A 溶劑比 B 溶劑吸收更多的光，但如果 A/B 混合物的成分隨時間保持一致，則將觀察到平滑、平坦的檢測器基線。但是，如果來自 A 通道的流量由于止回閥問題或氣泡而變得不一致，則 A/B 混合物的成分將不一致，從而導(dǎo)致基線中出現(xiàn)鋸齒狀圖案。
四、溫度影響：
? ? ? ? 不同的檢測器以不同的方式受到溫度變化的影響。眾所周知，折射率 (RI) 檢測的信號基線對溫度變化非常敏感。因此，穩(wěn)定檢測器本身和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的溫度將有助于最大限度地減少基線漂移。UV 吸光度檢測器也容易發(fā)生溫度變化，這會導(dǎo)致基線漂移，但與 RI 檢測器相比，變化程度較小。與過去的舊設(shè)計相比，現(xiàn)代紫外線檢測器設(shè)計對實(shí)驗(yàn)室溫度變化的影響要小得多。
? ? ? ? 面對色譜系統(tǒng)中的流動相存在雜質(zhì)的情況，恒譜生可以為您解決這些問題，恒譜生流動相過濾頭具有以下這些特性:
(1）性能穩(wěn)定，抗沖擊和交變負(fù)載能力優(yōu)于其他金屬過濾材料;
(2）孔隙均勻穩(wěn)定，透氣性好，壓力損耗小、過濾精度高、分離效果過濾性能穩(wěn)定;
(3）機(jī)械強(qiáng)度優(yōu)異，無須外加骨架支撐保護(hù)，安裝和使用簡單，維護(hù)方便，組裝性好。
(4)易于反吹、可清洗、再生能力強(qiáng)，反復(fù)清洗再生后過濾性能恢復(fù)90%以上，使用壽命長、材料利用率高。
? ? ? ?恒譜生鬼峰捕集去除柱可以有效吸附流動相中的雜志，從而縮短了方法驗(yàn)證和雜質(zhì)分析的時間。鬼峰捕集去除柱主要的特點(diǎn)是能夠去除溶劑包括有機(jī)溶劑中的雜質(zhì)，在反相色譜梯度分析時，將小柱安裝在梯度混合器和自動進(jìn)樣器之間，不僅能夠去除流動相中的雜質(zhì)，還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。
? ? ? ? 今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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發(fā)布于: 2022-09-09